洁净室洁净度与微生物测量检测方法

　食品药品包装材料车间、无菌医疗器械车间、医院洁净手术室、生物安全实验室、保健食品GMP车间、化妆品/消品车间、动物实验室、兽药GMP车间等洁净室、洁净厂房建设好后一般都需要第三方检测、调试等。

　　洁净室、洁净区的洁净度主要是靠送入足够量的洁净空气，以排替、稀释室内产生的颗粒污染物来实现的。为此，测定洁净室或洁净设施的送风量、平均风速、送风均匀性、气流流向及流型等项目十分必要。

　　单向流主要是依靠洁净气流推挤、排替室内、区内的污染空气以维持室内、区内的洁净度。因此，其送风断面风速及均匀性是影响洁净度的重要参数。较高的、较均匀的断面风速能更快、更有效地排除室内工艺过程产生的污染物，因此它们是主要关注的检测项目。

　　非单向流主要是靠送入的洁净空气来冲淡与稀释室内、区内的污染物以维持其洁净度。因此，换气次数越大，气流流型合理，稀释效果越显著，洁净度也相应提高。所以非单相流洁净室、洁净区的送风量及相应的换气次数，是主要关注的气流测试项目。为了获得可重复的读数，记录各测点风速的时间平均值。

　　1.洁净度的测定：

　　①.在施工验收规范JGJ71中规定如下：

　　a. 最低采样点数见下表，每个测点最少采样机3次。

　　表十七 最低采样点数表

　　b. 测定洁净度的最小采样量按下表：

　　表十八 最小采样量表(L)

　　c. 对于单向流洁净室采样口应朝着气流方向。对于非单向流洁净室采样口宜朝上。采样速度尽可能接近室内气流速度。即(等速采样)。

　　测点的布置原则：每层不少于5个测点，多于5点时可分层布置。测点布置在距地0.8m高的对 角线上。

　　② 洁净度测定结果的判定：

　　a. 如实测状态(空态，静态，动态)与事先约定的状态相同，以其洁净度级别上限作为评定标准。

　　b. 如实测状态为空态或静态，则动态时的粒子数肯定会高，有时可用空态粒子数的5~10倍来估算动态时的尘埃粒子数。

　　2.微生物粒子的测定：

　　①.采样点的布置和要求：

　　a. 浮游菌测定时，其采样点位置可以与悬浮粒子测定点的布置相同。测点距离地面0.8~1.5m,送风口测点位置距送风面30cm左右。根据需要可在关键部位增加测点。测点布置要均匀。见下表：

　　表十九 浮游菌测定最少采样点数表

　　b.沉降菌测定时，其采样点位置可以与悬浮粒子测定点的布置相同。测点距离地面0.8~1.5m。根据需要可在关键部位增加测点。测点布置要均匀。对于沉降菌法不仅仅满足于最少采样总数,还需满足最少采样培养皿总数。见下表：

　　沉降菌测定最少采样点数表

　　沉降菌测定最少培养皿数表

　　浮游菌测定法最小采样量应按不同洁净度等级来确定。见下表

　　浮游菌测定法最小采样量表

　　② 微生物粒子测定方法：

　　a. 浮游菌的测定法

　　首先，要对测定仪器，培养皿，采样器等进行消毒灭菌，采样口和采样管在使用前必须用高温灭菌。

　　第二，采样者应穿与洁净室等级相应的洁净服，放入或调换培养皿前，双手要用消毒剂消毒。

　　第三，仪器消毒后放入培养皿前，先开动真空泵抽气，使仪器中的残存消毒剂蒸发，时间不小于5min。

　　第四，关闭真空泵，放入培养皿，盖好盖子后调节采样器。

　　第五，置采样口于采样点，依次开启采样器，真空泵，转动定时器并根据采样量选定采样时间。

　　第六，采样结束后，将培养皿置于30~50oC恒温培养箱中，时间不小于48小时。

　　第七，用肉眼计数，然后用5~10倍的放大镜检查，是否有遗漏。

　　b. 沉降菌的测定法

　　首先，要对测定仪器，培养皿等进行严格的消毒灭菌，在37oC恒温培养箱中，进行不小于48小时的培养和观察，确认无菌后方可使用。

　　第二，一般采用90mm的沉降平皿，注入20mL培养基，放在测点处，开盖暴露30min,将培养皿盖盖上倒置，然后在30~35oC恒温培养箱中，进行不小于48小时的培养并用肉眼计菌落数，并记录生成的菌落数，然后用5~10倍的放大镜检查，是否有遗漏。